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[转载]2022.09.15 l 通过浸泡dsRNA的方法法对三叶斑潜蝇几丁质合成酶 2 基因的 RNA 干扰

已有 959 次阅读 2022-9-15 11:30 |系统分类:科研笔记|文章来源:转载

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通过浸泡dsRNA的方法法对三叶斑潜蝇几丁质合成酶 2 基因的 RNA 干扰

三叶斑潜蝇是一种园艺和蔬菜上的重要外来入侵性害虫，具有很强的竞争优势和危害潜力。几丁质合成酶是昆虫甲壳素代谢的关键酶之一，在昆虫的生长发育中发挥着重要作用。本研究克隆了三叶斑潜蝇的几丁质合成酶（CHS）转录本，结果表明LtCHS属于CHS2家族（图 1）。

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图 1. 几丁质合成酶的克隆与分析
表达分析表明，在不同发育阶段的蛹中存在最高丰度的LtCHS2，但在成虫不同组织之间没有显著差异（图 2）。

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图 2. CHS2 的表达分析
利用 LtCHS2 转录本开发了一种 dsRNA 浸泡方法，用于在三叶斑潜蝇中进行 RNA 干扰 (RNAi)研究。结果显示，可显著降低LtCHS2在蛹中的表达，且蛹的出蝇率显着低于对照（图 3）。

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图 3. RNAi CHS2之后三叶斑潜蝇的死亡率
基于RNAi的基因功能研究和害虫防治策略已经在一些物种中进行了尝试，但目前大部分研究仍处于起步阶段。本研究选择重要的生长发育基因CHS2作为靶基因，采用预蛹浸泡法验证CHS2基因的功能。一般情况下，dsRNA可以进入预蛹期并在蛹期发挥作用，导致CHS2转录本表达水平和羽化率下降。该结果为探索几丁质合酶基因在三叶斑潜蝇中的作用提供了理论依据，并可能提出新的害虫防治策略。

原文链接：

https://doi.org/10.3390/insects13090832

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