相册
发表评论 评论
- JANEWANGJK55
- mcr-1:
TCAGCGGATGAATGCGGTGCGGT
CTTTGACTTTGTCCGCGGTGACATCAAACAGCTTTAATAATGTCGGCGTGATCGCGTCAT
GGGTCAGGACGGTATCGGTTGCCATTGGCGTGATGCCAGTTTGCTTATCCGTCCAGAAAA
ATGCAGGCACACTGCGCTGTTCTTTTGGTGCAAAGGCATTTGGCATACCATGTAGATAGA
CACCGTTCTCACCCAGACTTTCGCCATGATCGCTGACATACAGCATTGAGACATCATAGG
CATTGCTGTGCGTCTGCAGCCACTGGATACTTTGAGCGATGAAATCATCGGTGGCAAGCA
AGGCATTGTCATAAGCATTGATCAAGGACTGATGTTCGCACTTGGCAAGCTCATTACCTT
CACACACTGGCGTGAATTTGGCAAACTTTTCATCATATCGCTTAAAATACGCAGGCCCGT
GATTGCCCATTTGGTGCAGCATGATCAGCATATCTTTGCCGTTATTGGCAGCGACAAAGT
CATCTAAGCCAACGAGCATACCGACATCGCGGCATTCGTTATAAGGATTGGTGTTGCAGA
TGGCGTTGTTGGTCGCGGATTTATAATCGGCAAATTGCGCTTTTGGCAGCTTATCCATCA
CGCCTTTTGAGTCCGAATTATTATCACGCCACAAGATACTTACGCCCAAGCGATCCAGCG
TATCCAGCACATTTTCTTGGTATTTGGCGGTATCGACATCATACTCATCCGCGCCCAGAT
AGCTGAACATACACGGCACAGAATACGCCGTCGATGTGCCGCACGATGTGACATTGCTAA
AATTGGTCACGCCATCGATCTTGGCAAGCTGTGGGAAAGTATCGCGCTCATAGCCATTGA
AGCTGACATGATCGGCGCGTGCCGTCTCACCGACGACGAACACCACTAGGCGTGGCTTAC
GCATATCAGGCTTGGTTGCTTGTACCGCGTCTTTGGCGTGATAAATGGTATCTTTTGGCG
CACTGGCTTTTTTATACTCAATACTGGCAAGCTTACCCACCGAGTAGATTGGCATGATCG
GATTGACATAGCTACGCAGCGGCTTATGCACGCGAAAGAAACTGGCATAATGACTGCTGA
ACGCCACCACAGGCAGTAAAATCAGCGCAAGACTTGCCACGATCAAGCCCAATCGGCGCA
TCAAACCCTTGCCCCAAGTCGGATAATCCACCTTAACAAAAGCCACAAGCAAACTTGGTA
GCACACCCAAACCAATGATACGCATGATAAACGCTGCGTTTAATAGATCCTTGGTCTCGG
CTTGGTCGGTCTGTAGGGCATTTTGGAGCATGGTCGTATCATAGACCGTGCCATAAGTGT
CAGTAAAATAACTGGTCACCGCGCCCATGATTAATAGCAAAATCAACACAGGCTTTAGCA
CATAGCGATACGATGATAACAGCGTGGTGATCAGTAGCATCGCGCCAAAGAGCACGACAG
CGATCGTCAGCACAAAGCCGAGATTGTCCGCGATGGGATAGGTTTGGCTGATTTTATCAA
AAAAGGTAAGATTGGCGGTCGCGGTCAAGAAAACGGCAACACTCGCCACAAGAACAAACG
GACTGACCGAGCGTCGGTACCACACAGAAGTATGCTGCATCAT
mcr-1 reverse:
ATGATGCAGCATACTTCTGTGTGGTACCGACGCTCGGTCAGTCCGTTTGTTCTTGTGGCGAGTGTTGCCGTTTTCTTGACCGCGACCGCCAATCTTACCTTTTTTGATAAAATCAGCCAAACCTATCCCATCGCGGACAATCTCGGCTTTGTGCTGACGATCGCTGTCGTGCTCTTTGGCGCGATGCTACTGATCACCACGCTGTTATCATCGTATCGCTATGTGCTAAAGCCTGTGTTGATTTTGCTATTAATCATGGGCGCGGTGACCAGTTATTTTACTGACACTTATGGCACGGTCTATGATACGACCATGCTCCAAAATGCCCTACAGACCGACCAAGCCGAGACCAAGGATCTATTAAACGCAGCGTTTATCATGCGTATCATTGGTTTGGGTGTGCTACCAAGTTTGCTTGTGGCTTTTGTTAAGGTGGATTATCCGACTTGGGGCAAGGGTTTGATGCGCCGATTGGGCTTGATCGTGGCAAGTCTTGCGCTGATTTTACTGCCTGTGGTGGCGTTCAGCAGTCATTATGCCAGTTTCTTTCGCGTGCATAAGCCGCTGCGTAGCTATGTCAATCCGATCATGCCAATCTACTCGGTGGGTAAGCTTGCCAGTATTGAGTATAAAAAAGCCAGTGCGCCAAAAGATACCATTTATCACGCCAAAGACGCGGTACAAGCAACCAAGCCTGATATGCGTAAGCCACGCCTAGTGGTGTTCGTCGTCGGTGAGACGGCACGCGCCGATCATGTCAGCTTCAATGGCTATGAGCGCGATACTTTCCCACAGCTTGCCAAGATCGATGGCGTGACCAATTTTAGCAATGTCACATCGTGCGGCACATCGACGGCGTATTCTGTGCCGTGTATGTTCAGCTATCTGGGCGCGGATGAGTATGATGTCGATACCGCCAAATACCAAGAAAATGTGCTGGATACGCTGGATCGCTTGGGCGTAAGTATCTTGTGGCGTGATAATAATTCGGACTCAAAAGGCGTGATGGATAAGCTGCCAAAAGCGCAATTTGCCGATTATAAATCCGCGACCAACAACGCCATCTGCAACACCAATCCTTATAACGAATGCCGCGATGTCGGTATGCTCGTTGGCTTAGATGACTTTGTCGCTGCCAATAACGGCAAAGATATGCTGATCATGCTGCACCAAATGGGCAATCACGGGCCTGCGTATTTTAAGCGATATGATGAAAAGTTTGCCAAATTCACGCCAGTGTGTGAAGGTAATGAGCTTGCCAAGTGCGAACATCAGTCCTTGATCAATGCTTATGACAATGCCTTGCTTGCCACCGATGATTTCATCGCTCAAAGTATCCAGTGGCTGCAGACGCACAGCAATGCCTATGATGTCTCAATGCTGTATGTCAGCGATCATGGCGAAAGTCTGGGTGAGAACGGTGTCTATCTACATGGTATGCCAAATGCCTTTGCACCAAAAGAACAGCGCAGTGTGCCTGCATTTTTCTGGACGGATAAGCAAACTGGCATCACGCCAATGGCAACCGATACCGTCCTGACCCATGACGCGATCACGCCGACATTATTAAAGCTGTTTGATGTCACCGCGGACAAAGTCAAAGACCGCACCGCATTCATCCGCTGA
- JANEWANGJK55
- the presence of mcr-1 by PCR with the primers
CLR5-F (5ʹ-CGGTCAGTCCGTTTGTTC-3ʹ) and
CLR5-R (5ʹ-CTTGGTCGGTCTGTA GGG-3ʹ)
Emergence of plasmid-mediated colistin resistance mechanism MCR-1 in animals and human beings in China: a microbiological and molecular biological study
Jianzhong Shen
- JANEWANGJK55
- 一、 培养基制备：
1） 双抗平板：普通营养琼脂含叠氮钠100ug/ml，供体菌株相应抗性。
2） 叠氮钠抗性平板：普通营养琼脂含 叠氮钠100ug/ml。
3） 哥伦比亚血平板（公司购买）
二、 实验步骤：
1） 受体菌、供体菌加抗性普通营养肉汤分别过夜培养；
2） 取无菌生理盐水2ml 将受体菌J53(叠氮钠抗性)、供体菌分别调整至0.5麦氏（约1~2×108），将受体菌、供体菌混匀，0.22滤膜过滤，取出滤膜，菌液面向上放置于血平板上，37°静置培养6~8小时；
3） 将滤膜取出放入4ml普通营养肉汤中漂洗干净，将菌液倍比稀释。在不同的稀释度取100ul分别涂双抗平板（接合子计数）和叠氮钠抗性平板（受体菌计数）
4） 接合率计算：接合子数/受体菌数
5） 备注：
1、一般菌株的接合转移效率为10 负5到负7次方，请选择合适的稀释度，第一次做可以考虑原液涂板。
2、叠氮钠有毒性，使用时小心。
